Pourquoi le kit RIDASCREEN SET A,B,C,D,E nécessite-t-il l'utilisation de 2 substrats dans sa procédure d'analyse?
1 réponse
Il y a un seul substrat dans le coffret R4101 RIDASCREEN SET A,B,C,D,E
Ce substrat est le Red Chromogen Pro coloré en rouge flacon capuchon marron et prêt a l’emploi. C’est une solution stabilisée d’un mélange de substrat/chromogène.la solution contient :
- TMB (3,3’,5,5’-tétraméthylbenzidine) : un chromogène qui devient bleu lorsqu’il est oxydé par la peroxydase
- Peroxyde d’hydrogène (H2O2) : un agent oxydant qui réagit avec le TMB en présence de l’enzyme HRP
- Tampon : maintien un pH optimal pour la réaction enzymatique
- Stabilisant : garantissent la stabilité de la solution pensant le stockage.
Mais il y a deux conjugués et la procédure est la suivante :
En ajoutant l’échantillon dans les puits A à G (voir les lettres sur le côté gauche du cadre) et le contrôle positif dans le puits H, les toxines présentes se lient à des anticorps de capture spécifiques. Les composants de l’échantillon qui ne se lient pas aux anticorps sont ensuite éliminés lors de l’étape de lavage. Les toxines immobilisées sont liées par un mélange d’anticorps spécifiques conjugué à la biotine. Tous conjugué non lié est ensuite éliminé lors d’une étape de lavage. Après l’ajout de la streptavidine-POD ainsi qu’une étape de lavage supplémentaire, la détection est réalisée par l’ajout de la solution substrat/chromogène. Le conjugué streptavidine-POD lié transforme le substrat/chromogène rougeâtre en un produit final bleu. L’ajout de la solution d’arrêt provoque un changement de couleur du bleu au jaune. La mesure est effectuée photométriquement à 450 / 620 +-10 nm. L’absorbance est proportionnelle à la concentration de SET dans l’échantillon.
Autres questions sur le même sujet
Comment rejeter en toute sécurité des fluides contaminés par de l'isopropanol ?
Dernière réponse : Bonjour, Il existe de nombreuses filières pour éliminer des fluides, la composition du mélange est importante pour connaitre la bonne filière de retraitement. Lire plus
Quelles sont les dernières évolutions dans la surveillance microbiologique ?
Dernière réponse : La surveillance microbiologique a connu plusieurs évolutions importantes ces dernières années, avec le développement de technologies et de méthodes visant à accroître la rapidité, la précision, la... Lire plus
Quelles sont les analyse réaliser pour voir si il y a contamination industrielle de l'eau ?
Dernière réponse : L'analyse qui permet de mesurer une pollution industrielle est la présence des métaux lourds tels que : les nitrates, hydrocarbures, le zinc, le cuivre, plomb etc. Lire plus
Quelles sont les techniques microbiologiques les plus couramment utilisées en laboratoire d'analyse?
Dernière réponse : Les techniques microbiologiques en laboratoire d'analyse reposent sur divers procédés pour identifier et quantifier les micro-organismes. Lire plus
Comment interpréter les unités de mesure d'un humidimètre pour la pierre calcaire et évaluer la fiabilité des résultats pour déterminer l'origine de l'humidité?
Dernière réponse : Interpréter les unités de mesure d'un humidimètre pour la pierre calcaire nécessite une compréhension des valeurs d'humidité relative mesurées en pourcentage (%). Lire plus
Comment adapter l’auto-calibrage pour compenser des variations de 1e3 à plus de 2e6 cellules/ml dans des circuits de semi-conducteurs ?
Dernière réponse : Pour adapter l'auto-calibrage face à des variations de 1e3 à plus de 2e6 cellules/ml dans les circuits de semi-conducteurs, l'utilisation d'un analyseur de cytométrie en flux tel que le BactoSense... Lire plus
Comment optimiser le protocole de dénombrement sur matrices complexes (eaux de loisirs, extraits de boues) pour obtenir des résultats stables selon ISO 10705-2 ?
Dernière réponse : Pour optimiser le protocole de dénombrement des coliphages somatiques sur des matrices complexes telles que les eaux de loisirs ou les extraits de boues, conformément à l'ISO 10705-2, il est crucial... Lire plus
En test sur eaux usées, comment ajuster le protocole pour révéler l'inhibition de mobilité sur 24 à 48h avec œufs dormants et milieux concentrés ?
Dernière réponse : Pour ajuster le protocole de test de toxicité sur les eaux usées et révéler l'inhibition de mobilité sur 24 à 48 heures en utilisant des œufs dormants et des milieux concentrés, il est essentiel de... Lire plus
Comment ajuster le calibrage en flux pour des échantillons à température de 5-40°C et détecter des micro-organismes critiques en environnement pharma ?
Dernière réponse : Pour ajuster le calibrage en flux dans des conditions de température variant entre 5 et 40°C, il est crucial d'utiliser un analyseur de cytométrie en flux capable de maintenir une stabilité thermique... Lire plus
Comment adapter la fréquence d’analyse pour maintenir près de 54 mesures/jour en condition de réactifs proches de 1000 mesures dans un environnement instable ?
Dernière réponse : Pour maintenir une fréquence d'analyse de 54 mesures/jour dans un environnement instable, tout en préservant une capacité de réactifs proche de 1000 mesures, il est crucial d'optimiser à la fois la... Lire plus
